• Twitter
  • Dribbble
  • Instagram
  • English English English en
  • فارسی فارسی فارسی fa
شماره تماس ما: 03135354146 و 03191090166
شرکت معیار دانش پارس
  • صفحه اصلی
  • آزمایشگاه ها
    • آزمایشگاه شیمی
    • آزمایشگاه طیف‌سنجی مادون قرمز IR
    • آزمایشگاه میکروبیولوژی
    • آزمایشگاه جذب اتمی (AAS)
    • آزمایشگاه کروماتوگرافی گازی (GC)
    • آزمایشگاه طیف سنج نشر اتمی (ICP)
    • آزمایشگاه کروماتوگرافی گازی -طیف سنج جرمی (GC-MS)
    • آزمایشگاه کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)
    • آزمایشگاه کنترل کیفی سموم دفع آفات نباتی
    • آزمایشگاه کنترل کیفی کودهای شیمیایی و بیولوژیکی
    • آزمایشگاه خاک شناسی
    • دامپزشکی معیار دانش پارس
  • واحد آموزش
    • تقویم
      • تقویم دوره های آموزشی ماهانه- بهمن
    • دوره های آموزشی تخصصی
      • تشریح الزامات استاندارد ISO/IEC 17025
      • دوره آزمون مهارت بر اساس استاندارد ایزو 17043
      • دوره قوانین تصمیم و نقش عــدم قطـعیت انــدازه گیــری
      • آشنایی با اصول دستگاه طیف سنجی جذب اتمی
      • دوره آموزشی نمونه برداری و ارزیــابی کیفی اقلام و قطعــات
    • مشاوره
      • مشاوره استاندارد ISO/IEC17025
      • آموزش استاندارد ایزو 17025
      • دانلود چک لیست استاندارد 17025
      • مشاوره استانداردISO 15189
      • تغییرات ویرایش جدید استاندارد 2017:ISO/IEC 17025
  • مقالات
  • محصولات
    • پکیج آموزشی
    • تولیدمواد مرجع
      • مواد مرجع
    • نرم افزارها
      • نرم افزار جامع مدیریت اطلاعات آزمایشگاهی
  • حیطه ی فعالیت
    • فرآورده های غذایی
      • شیر و فرآورده های لبنی
      • گوشت و فرآورده های گوشتی
      • غلات و حبوبات
      • نوشیدنی ها
      • ادویه و چاشنی ها
      • آجیل و خشکبار
      • کنسرو و کمپوت
      • قند و شکر و فرآورده های آن
      • روغن های خوراکی
    • فرآورده های آرایشی و بهداشتی
    • خوراک دام وطیور و آبزیان
    • آب و فاضلاب
    • محیط زیست
    • کنترل کیفی سموم و دفع آفات نباتی
    • خدمات مهندسی بهداشت حرفه ای
  • نمونه برداری
    • نمونه برداری از عسل
    • نمونه برداری از پنیر
    • نمونه برداری از غذای رستوران
    • نمونه برداری از کره
    • نمونه برداری از آب و پساب
    • نمونه برداری از خامه
  • منابع انسانی
    • فیش حقوقی
    • کارکرد پرسنلی
    • فرم استخدام
    • نظام پیشنهادات
  • تماس با ما
  • درباره ی ما
    • مجوز و افتخارها
      • مجوز مرکز ملی تایید صلاحیت ایران(NACI)
      • مجوز دانش بنیان
      • مجوز دامپزشکی
      • مجوز غذا و دارو
      • مجوز سازمان حفظ نباتات
      • مجوز سازمان نظام مهندسی کشاورزی و منابع طبیعی
      • مجوز محیط زیست
      • بهداشت حرفه ای
      • تاییدیه آموزشی
      • مجوز آکرودیته آزمایشگاه
      • افتخارات
    • قوانین و مقررات سایت
    • درباره ی معیار
    • اعضاء هیئت مدیره
  • فارسی
    • English
  • جست و جو
  • منو منو

روش کار با دستگاه HPLC

اساس کار دستگاه HPLC

روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC):

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) از جمله تکنیک‌های جداسازی (Separation) محسوب می شود. درتمامی روش‌های کروماتوگرافی، جداسازی بر پایه تفاوت مقداری آنالیت (ماده مورد جداسازی) در دو فاز ساکن (Stationary Phase) و متحرک (Mobile Phase) انجام می‌شود. این تفاوت مقدار، در نهایت منجر به تشکیل تعادلی می‌گردد که آن را با پارامتری به نام ثابت توزیع (K) بیان می‌کنند. در این رابطه  Cm و Cs به ترتیب نشان‌دهنده غلظت مولی آنالیت در فازمتحرک و فاز ساکن است.

K=CS/CM

در کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا فاز متحرک مایع و فاز ساکن جامد می باشد. اساس کار دستگاه شامل برهمکنش نمونه و فاز ساکن مطابق قطبیت آنها است. در مورد قطبیت فاز‌های ساکن و متحرک یک قاعده کلی وجود دارد. طبق این قاعده، قطبیت حل‌‌شونده و فاز متحرک باید نزدیک به هم باشد، ولی با فاز ساکن اختلاف داشته باشد.

روش کار با دستگاه HPLC( اجزاء و قسمت‌های مختلف دستگاه HPLC ):

دستگاه و تجهیزات HPLC شامل قسمت‌های مختلفی است که در ادامه به آنها اشاره می‌شود:

1-   مخازن حلال: که در آنها فاز متحرک و یا حلال‌های شست و شودهنده ستون ریخته شده است.

فاز متحرک متناسب با نوع نمونه شامل حلال های آلی مانند متانول و استونیتریل و یا حلال های آبی شامل آب، بافر، محلول های نمکی و یا سایر حلال های سازگار با دستگاه، قابل تغییر است.

2-   موتور یا پمپ: به منظور انتقال حلال و همچنین نمونه در فضای نسبتا طویل ستون، نیاز به ایجاد فشاری در سیستم است که برای ایجاد آن حداقل از یک پمپ یا موتور استفاده می‌شود. حلال (فاز متحرک) توسط پمپ با سرعت و جریان ثابتی بر روی فاز ساکن حرکت داده می‌شود. فشار سیستم به اندازه (سایز) ذرات موجود در ستون، گرانروی (Viscosity) و سرعت جریان فاز متحرک بستگی دارد. بسته به نوع جداسازی، میزان سرعت جریان فاز متحرک تعیین می‌گردد. در مواردی که با تعددی از آنالیت‌ها مواجه هستیم، هر گونه جدا شده، خود را به صورت یک پیک در کروماتوگرام نهایی نشان می‌دهد. در سرعت جریان کمتر فاز متحرک، فاصله بین پیک‌ها افزایش یافته و جداسازی بهتری خواهیم داشت. به عنوان فاز متحرک، مخلوطی از حلال‌ها در ازای یک حلال خالص می‌تواند به‌کار گرفته شود. نسبت اجزاء فاز متحرک در طی یک تزریق ممکن است ثابت باشد که در این صورت به آن روش ایزوکراتیک (Isocratic) گفته می‌شود. در حالتی دیگر که به آن روش گرادیانت (Gradient) گفته می‌شود، طی یک تزریق و با پیشرفت زمان، طبق برنامه‌ای که از قبل برای سیستم تعریف شده است، درصد متفاوتی از دو یا چند حلال مخلوط شده و در سیستم توسط پمپ جریان می‌یابد.

3-   Degasser : قبل از ورود حلال به داخل پمپ دستگاه، باید هرگونه حباب هوا یا گاز زدوده شود. این کار توسط دستگاه هوا زدا صورت می گیرد که سیستم نیمه تراوای داخل آن گاز را تراوش نموده ولی اجازه خروج مایع را نمی دهد.

4-   تزریق‌کننده (Injector): تزریق نمونه، بسته به نوع دستگاه، به دو شکل دستی و یا خودکار انجام می‌گیرد. در روش خودکار، نمونه در ظروف مخصوصی ریخته شده و در محل تعبیه شده در دستگاه قرار می‌گیرد. پس از اینکه اپراتور دستور تزریق را (از طریق نرم‌افزار) می‌دهد، نمونه توسط یک سرنگ به سیستم منتقل می‌شود. در روش دستی، از سرنگ‌هایی با ظرفیت‌های مختلف برای تزریق نمونه استفاده می‌شود. حجم نمونه تزریق شده (در هر دو روش)، به حجم حلقه نمونه‌بردار (Loop) بستگی دارد و مقدار آن معمولاً در حد 5 تا 500 میکرولیتر است. نمونه ابتدا وارد این حلقه شده و پس ازآماده شدن سیستم به همراه فاز متحرک وارد ستون می‌شود.

5-   ستون:  پس از تزریق، نمونه ابتدا وارد قسمتی به نام پیش‌ستون (pre-column) یا ستون محافظ (Guard column) می‌شود. نقش این ستون، محافظت از ستون اصلی است. طول این ستون معمولا در حد سانتی‌متر است و جنس آن از فولاد ضد زنگ است. ماده پرکننده (Packing) ستون محافظ از جنسی مشابه ماده پرکننده ستون اصلی است. هم جنس بودن نوع پرکننده این مزیت را دارد که اگر ماده‌ای که با ذرات ستون وارد واکنش شود در نمونه موجود باشد، در ابتدا در ستون محافظ به دام افتاده وستون اصلی را دچار آسیب نمی‌کند. طول ستون‌های اصلی دستگاه معمولا حدود 30-10 سانتی‌متر بوده و درون ستون را با موادی که به یکی از دو فرم پوسته‌دار و یا متخلخل است، پر کرده‌اند. سایز این مواد پرکننده که بر کیفیت جداسازی تاثیر فراوانی دارد، متفاوت بوده و معمولا در حد 3 تا 5 میکرومتر است.

ستون می‌تواند قطبی و یا غیرقطبی باشد. از مرسوم‌ترین ستون‌های غیرقطبی می‌توان به C18، اکتادسیل سیلان (ODS) اشاره کرد. جنس ستون‌ها از فولاد ضدزنگ (Stainless Steel) است. پس از ورود نمونه به ستون، براساس تفاوت قطبیت، اجزاء مختلف نمونه در زمان‌های متفاوتی با نام زمان بازداری (Retention Time) از یکدیگر جدا شده و برای تشخیص نوع ماده به سمت آشکارساز(Detector) هدایت می‌شوند.

در نهایت پس از اتمام کار باید ستون را شستشو دهیم. برای شستشو، بسته به نوع ستون، حلال متفاوتی را با ترتیب خاص انتخاب می‌کنیم. برای مثال در ستون‌های غیرقطبی پس از اتمام کار، ابتدا ستون را با یک حلال قطبی (معمولا آب) و سپس با یک حلال غیرقطبی (معمولا متانول) شست و شو می‌دهند.

از انواع دیگر ستون می توان به ستون کربوهیدرات، آروماتک های حلقوی، ستون آمینی، کاتیونی، C8 و… اشاره کرد.

6-   آشکارساز (Detector): آشکارساز بر اساس نوع آنالیت انتخاب می‌شود.

الف -از پرکاربردترین انواع آشکارساز، طیف‌سنج UV-Vis است که برای اجسامی که در این ناحیه جذب داشته باشند مورد استفاده قرار می‌گیرد. در این آشکارساز با استفاده از تفاوت میزان جذب نمونه با منبع نوری اولیه و در نهایت با استفاده از قانون بیر لامبرت، غلظت نمونه اندازه‌‌گیری می‌شود. در مواردی که از این آشکارساز استفاده می‌شود انتخاب طول موج مناسب یکی از مواردی است که می‌بایست مد نظر قرار بگیرد. در طول موج انتخابی، نباید مزاحم‌های موجود در نمونه و همچنین حلال جذب داشته باشند.

ب- آشکارساز ضریب شکست: اساس کار این آشکارساز بر مبنای تغییراتی است که در ضریب شکست سیستم حلال به تنهایی و سیستم حلال همراه با نمونه، ایجاد می‌شود. پاسخ این آشکارساز به حرارت وابسته است.

ج- آشکارساز فلورسانس، حساس‌تر از آشکارساز UV/Vis است ولی ترکیبات کمی موجودند که خاصیت فلورسانس داشته باشند؛ درنتیجه کاربرد این آشکارساز نیز محدود است.

از دیگر بخش های یک سیستم HPLC می توان به بخش کنترل کننده دمای ستون یا همان آون ستون اشاره نمود. یکی دیگر از بخش های این تجهیز،Mixer  است که حلال ها و نمونه را قبل از تزریق به ستون بصورت همگن مخلوط می نماید.

کلیه حلال ها قبل از قرار گیری به عنوان فاز متحرک توسط فیلتر های 2/0 میکرومتر فیلتر می شوند. هم چنین نمونه ها پس از فرایند آماده سازی و استخراج از فیلترهای سرسرنگی با منافذ 45/0 میکرومتر فیلتر می گردند. کلیه این امور به منظور محافظت از ستون و دتکتور جهت جلوگیری از ورود آلودگی و ذرات صورت می گیرد.

باکتری لیستریا منوسیتوژنز
آزمون های تصویری آزمایشگاه

لیستریا منوسیتوژنز

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/لیستریا-منوسیتوژنز-1.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2023-01-15 10:56:562023-01-15 10:57:00لیستریا منوسیتوژنز
آموزش Qualification
آزمون های تصویری آزمایشگاه

آموزش Qualification دستگاه GC

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/Qualification-دستگاه-GC.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2023-01-15 09:14:592023-01-15 09:15:03آموزش Qualification دستگاه GC
بررسی استافیلوکوکوس اورئوس
آزمون های تصویری آزمایشگاه

استافیلوکوکوس اورئوس

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/استافیلوکوکوس-اورئوس.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2023-01-15 08:54:062023-01-15 09:11:07استافیلوکوکوس اورئوس
اجزاء و قسمت‌های مختلف دستگاه HPLC:
آزمون های تصویری آزمایشگاه

روش کار با دستگاه HPLC

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/11/روش-کار-با-دستگاه-HPLC-1.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2023-01-03 13:09:502023-01-15 09:17:31روش کار با دستگاه HPLC
روش های تولید تانول
آزمون های تصویری آزمایشگاه

متانول

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/11/متانول-1.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2022-12-24 10:40:152023-01-15 09:18:56متانول
آنالیز آب
آزمون های تصویری آزمایشگاه

آنالیز آب آشامیدنی

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/آنالیز-آب-آشامیدنی-1.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2022-12-05 12:21:212023-01-23 10:58:45آنالیز آب آشامیدنی
دستگاه طیف سنجی جذب اتمی
آزمون های تصویری آزمایشگاه

آشنایی با اصول دستگاه طیف سنجی جذب اتمی

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/اصول-دستگاه-طیف-سنجی-جذب-اتمی.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2022-12-05 11:20:292023-01-15 09:24:43آشنایی با اصول دستگاه طیف سنجی جذب اتمی
روش کار با دستگاه جذب اتمی
آزمون های تصویری آزمایشگاه

کار با دستگاه طیف سنجی جذب اتمی

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/11/کاربا-دستگاه-طیف-سنجی.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2022-12-03 12:12:322023-01-15 09:27:29کار با دستگاه طیف سنجی جذب اتمی
بررسی میزان آرسنیک
آزمون های تصویری آزمایشگاه

اندازه گیری آرسنیک در انواع بافت‌ها

https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/10/اندازه-گیری-آرسنیک.jpg 204 200 نرگس نجارزادگان https://meyardanesh.com/wp-content/uploads/2022/05/new-logo-fa-300x141.png نرگس نجارزادگان2022-12-01 10:35:112023-01-15 09:31:11اندازه گیری آرسنیک در انواع بافت‌ها
قبلیبعدی

ارتباط با ما، جهت درخواست انجام آزمون در آزمایشگاه معیار دانش پارس

ساعت 8:00 الی 16:00  |  شماره تماس: 03191090166

واحد آموزش: داخلی های 104، 105، 106

پذیرش: داخلی 101، 122، 124 |مدیر کنترل کیفیت: داخلی 102

ارسال ایمیل درخواست آزمون: meyardanesh.pars@gmail.com

  • اندازه گیری استرول به روش کروماتوگرافی گازی
  • اندازه گیری نیتروزآمین ها
  • اندازه گیری اسیدیته و عدد اسیدی در روغن و چربی ها
  • اندازه گیری جیوه
  • آزمون آفلاتوکسین M1
  • اندازه گیری نیترات در آب
  • اندازه گیری سیانید در آب
  • اندازه گیری مشتقات نفتی
  • اندازه گیری 1و4 دی اکسان
  • آزمون BTEX (نمونه زوربنت)
  • اندازه گیری دیاستازی در عسل
  • آزمون فرمالدهید در شوینده ها
  • اندازه گیری HMF در مواد غذایی
  • اندازه گیری دی اکسان در شامپو
  • اندازه گیری آنتی اکسیدان در انواع روغن
  • اندازه گیری مواد فعال در سطح
  • اندازه گیری پروتئین(نیتروژن)کجدال(دستگاهی)
  • اندازه گیری جانشین کره کاکائو (روغن پالم)
  • اندازه گیری چربی لبنیات به روش ژربر
  • اجزای اصلی ژل رویال
  • اندازه گیری سرب در انواع بافت ها
  • اندازه گیری مایکوتوکسین با دستگاه (HPLC)
  • شمارش کپک و مخمر
  • اندازه گیری ملامین در شیر و فرآورده های لبنی
  • اندازه گیری ناتامایسین در فرآورده های غذایی
  • اندازه گیری اکریل آمید در چیپس و فرآورده های سیب زمینی
  • آزمون باقی مانده ی آفت کش ها در مواد غذایی( نمونه عسل)
  • اندازه گیری باقی مانده ی آفت کش ها در مواد غذایی
  • اندازه گیری ویتامین ها
  • اندازه گیری رنگ های طبیعی و مصنوعی
  • اندازه گیری تری هالومتان ها
  • اندازه گیری چربی در مواد غذایی
  • اندازه گیری آنتی بیوتیک ها
  • اندازه گیری نگهدارنده ها
  • اندازه گیری کمپیلوباکترها در آزمایشگاه میکروبی

لینک های مفید :

تعیین اصالت ژل رویال

اندازه گیری نیتروزآمین

اندازه گیری دی اکسان

تعرفه های خدمات آزمون

فرم استخدام

معرفی برخی از همکاران ما

صنایع شیر پگاه

ذوب آهن اصفهان

فولاد مبارکه اصفهان

شرکت گل گهر سیرجان

اداره کل دامپزشکی اصفهان

شماره تماس های مجموعه:

03191090166 و 03135354146

پذیرش: 122، 124، 101

آموزش: 104، 105، 106

اداری: 107، 120، 119، 117

پشتیبانی: داخلی های 113 و 123

آدرس مجموعه:

اصفهان،خیابان جی شرقی، بلوار ارغوانیه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اصفهان، درب شماره 1، پژوهشگاه مرکزی، شرکت معیار دانش پارس

ساعات کاری:

شنبه تا چهارشنبه: 8:00 الی 16:00

پنجشنبه ها: 8:00 الی 14:30

تمامی حقوق مادی و معنوی متعلق به مجموعه ی معیار دانش پارس می باشد

اسکرول به بالا
  • English
  • فارسی