آزمون اندازه گیری رنگ مصنوعی وطبیعی و مصنوعی در آزمایشگاه
اسمیت، یک شیمی‌دان با استعداد، به همراه دوستانش، سارا و مایک، در حال انجام آزمون رنگ های طبیعی و مصنوعی هستند. آنها به کمک دستگاه HPLC قصد دارند رنگ‌های مواد غذایی را اندازه گیری کنند. بالاخره روز آزمایش فرا رسید اسمیت، سارا و مایک به آزمایشگاه آمده بودند تا رنگ‌های مواد غذایی را با دستگاه HPLC اندازه گیری کنند. مراحل آزمایش به شرح زیر بود:
روش اندازه گیری رنگ طبیعی و مصنوعی
مرحله ۱: جمع‌آوری نمونه‌ها
آنها نمونه‌هایی از مواد غذایی رنگی مختلف را جمع آوری کردند. یک نوشابه حاوی رنگ مصنوعی و میوه‌هایی که حاوی رنگ‌های طبیعی هستند.
مرحله ۲: تجزیه نمونه‌ها
نمونه‌های جمع‌آوری شده را خرد کردند و به اجزای مختلف تجزیه کردند تا بتوانند رنگ‌ها را شناسایی کنند. تجزیه شامل استخراج رنگ‌ها از نمونه‌ها و تبدیل آنها به مایعی مناسب بود.
مرحله ۳: تزریق نمونه به دستگاه HPLC
نمونه‌ها پس از تجزیه، به دستگاه HPLC منتقل شدند. این دستگاه دارای یک ستون جداکننده است که مایع حاوی نمونه‌ها را از آن عبور می‌دهد. ستون جداکننده دقت بالایی دارد.
مرحله ۴: تفکیک رنگ‌ها
به محض ورود نمونه به ستون، اجزای مختلف رنگ‌ها با سرعت‌های مختلف در ستون حرکت می‌کنند. این تفکیک توسط مایع حامل و فشار بالا انجام می‌شود.
مرحله ۵: تشدید نوری
بعد از تفکیک رنگ‌ها، نمونه‌ها به تشدیدکننده نوری منتقل می‌شوند یا دتکتور. این دستگاه نور را از نمونه عبور می‌دهد و مقدار نوری که توسط هر رنگ جذب می‌شود را اندازه گیری می‌کند.
مرحله ۶: ثبت نتایج
دستگاه HPLC به ازای هر رنگ مقدار جذب نوری را ثبت می‌کند. این نتایج به شکل یک نمودار به اسم کروماتوگرام ظاهر می‌شود. از این کروماتوگرام می‌توان میزان و نوع رنگ‌های موجود در نمونه‌ها را تشخیص داد.
سوالات ما از اسمیت
با این روش دقیق و علمی، اسمیت و دوستانش می‌توانند میزان و نوع رنگ‌های مصنوعی و طبیعی را در مواد غذایی تعیین کنند و به بهبود کیفیت و سلامت مواد غذایی کمک کنند.
سوالات:
از چه ستونی در HPLC استفاده کردید؟
در آزمون اندازه‌گیری رنگ‌های مواد غذایی، از ستون‌های جداکننده به نام “ستون C18” یا “سی۱۸” معمولاً استفاده می‌شود. این ستون‌ها از ماده‌ای به نام اکساید سیلیکا (silica gel) پوشیده شده‌اند و به عنوان یک ماتریس جداکننده برای مولکول‌های مختلف در نمونه‌ها عمل می‌کنند. ستون C18 به دلیل ویژگی‌هایش مانند توانایی جذب موثر برای ترکیبات هیدروفوبی (آب نکشنده) و نفوذپذیری به نسبت معقول برای مولکول‌ها، گزینه‌ی مناسبی برای این نوع آزمایشات است. این ستون‌ها به تفکیک موثر و دقیق مولکول‌ها از یکدیگر کمک می‌کنند تا نتایج دقیق‌تری در HPLC به دست آید.
برای دیدن ادامه مطلب درباره آزمایشگاه HPLC کلیک کنید.
نکات مهم در آزمون اندازه گیری رنگ های طبیعی و مصنوعی با HPLC چیست؟
انتخاب مناسب ستون: انتخاب ستون جداکننده مناسب برای مولکول‌های مورد مطالعه حیاتی است. ستون C18 برای بسیاری از ترکیبات مناسب است، اما ممکن است نیاز به ستون‌های دیگر نیز وجود داشته باشد.
تنظیمات پارامترها:
تنظیم دقیق پارامترهای دستگاه HPLC شامل فشار، دما، نرخ جریان مایع حامل، و طول موج اسپکترا بسیار حیاتی است. این تنظیمات باید با دقت انجام شوند تا تفکیک مناسب انجام شود.
توجه: آماده‌سازی نمونه باید با دقت انجام شوند.
مراحل آماده سازی نمونه
کالیبراسیون:
قبل از شروع آزمایش، دستگاه HPLC باید کالیبره شود. برای این منظور، استفاده از استانداردهای معتبری که مقادیر دقیقی از رنگ‌های مورد مطالعه را دارند، ضروری است.
نگهداری دستگاه:
دستگاه HPLC باید به طور منظم نگهداری شود. شامل تعویض ستون، تعویض فیلترها و پمپ‌ها، و کالیبراسیون مجدد دستگاه می‌شود.
ثبت نتایج:
نتایج به دقت ثبت و ذخیره شوند. کروماتوگرام کسب شده به عنوان اثبات انجام آزمایش استفاده می‌شوند. مطالعه دقیق کروماتوگرام: تفسیر کروماتوگرام به دقت انجام شود تا نتایج صحیح بدست آید و ترکیبات مورد نظر به درستی شناسایی شوند.
کنترل کیفیت:
کنترل کیفیت به منظور اطمینان از دقت نتایج و اصلاح هر گونه خطای احتمالی بسیار مهم است.
رعایت ایمنی: در آزمایشگاه، ایمنی همیشه در اولویت باشد. از لباس‌ها و وسایل محافظ استفاده کنید و دستورات ایمنی را رعایت کنید.
ارتباط با تخصصی ترین ها
ارتباط با تخصصی‌ترین ها: در صورت نیاز به تفسیر نتایج پیچیده یا مشکلات فنی، به تخصصی‌ترین آزمایشگاه ها همچون معیار دانش پارس در زمینه HPLC مشورت کنید. رعایت این نکات مهم به دقت در انجام آزمایشات HPLC بسیار کمک‌کننده است تا نتایج دقیق و قابل اعتماد به دست آید.
پارامترهای دستگاه HPLC
رعایت این نکات مهم به دقت در انجام آزمایشات HPLC بسیار کمک‌کننده است تا نتایج دقیق و قابل اعتماد به دست آید. تنظیمات پارامترهای دستگاه HPLC در این اندازه گیری چگونه است؟ دما فشار و…
تنظیمات پارامترهای دستگاه HPLC
تنظیمات دقیق پارامترهای دستگاه HPLC برای اندازه‌گیری رنگ‌های مواد غذایی بستگی به نوع نمونه و ترکیبات مورد مطالعه دارد. اما در اینجا یک تنظیمات معمولی برای اندازه‌گیری رنگ‌ها در HPLC ذکر می کنم:
فشار:
فشار در دستگاه HPLC باید معمولاً در محدوده ۱۰۰۰ تا ۶۰۰۰ psi (پوند در اینچ مربع) باشد. تنظیم دقیق فشار بستگی به نوع ستون، نوع نمونه، و ترکیبات مورد مطالعه دارد.
دما:
دمای دستگاه نیز مهم است. برای بسیاری از نمونه‌ها و ستون‌های C18، دمای ۲۵-۴۰ درجه سلسیوس مناسب است. اما دما باید به تعداد مولکول‌های هدف و ویژگی های ستون انطباق داشته باشد.
نرخ جریان مایع حامل (Flow Rate):
نرخ جریان مایع بستگی به ستون و نمونه دارد. معمولاً نرخ‌های جریان میانگین بین ۰.۵ تا ۲ میلی‌لیتر در دقیقه استفاده می‌شود. اما ممکن است در برخی موارد نیاز به نرخ جریان بیشتر یا کمتر باشد.
نوع مایع حامل:
انتخاب مایع حامل نیز بستگی به نوع ترکیبات مورد مطالعه دارد. معمولاً مخلوطی از آب و اسید فسفریک یا آب و اسید فورمیک به عنوان مایع حامل استفاده می‌شود.
نوع دتکتور:
نوع دتکتور (معمولاً UV-Visible دتکتور) نیز تعیین کننده است. برای رنگ‌ها، اغلب از دتکتور UV با موج‌طول گردایی ۲۵۴ نانومتر و ۴۵۰ نانومتر استفاده می‌شود.
حجم نمونه:
حجم نمونه معمولاً بین ۵ تا ۲۰ میکرولیتر است. اما حجم دقیق بستگی به حساسیت دستگاه و غلظت نمونه دارد.
تنظیمات پارامترهای دستگاه HPLC
تنظیمات دقیق پارامترهای دستگاه HPLC برای اندازه‌گیری رنگ‌های مواد غذایی بستگی به نوع نمونه و ترکیبات مورد مطالعه دارد. اما در اینجا یک تنظیمات معمولی برای اندازه‌گیری رنگ‌ها در HPLC ذکر می کنم:
فشار:
فشار در دستگاه HPLC باید معمولاً در محدوده ۱۰۰۰ تا ۶۰۰۰ psi (پوند در اینچ مربع) باشد. تنظیم دقیق فشار بستگی به نوع ستون، نوع نمونه، و ترکیبات مورد مطالعه دارد.
دما:
دمای دستگاه نیز مهم است. برای بسیاری از نمونه‌ها و ستون‌های C18، دمای ۲۵-۴۰ درجه سلسیوس مناسب است. اما دما باید به تعداد مولکول‌های هدف و ویژگی های ستون انطباق داشته باشد.
نرخ جریان مایع حامل (Flow Rate):
نرخ جریان مایع بستگی به ستون و نمونه دارد. معمولاً نرخ‌های جریان میانگین بین ۰.۵ تا ۲ میلی‌لیتر در دقیقه استفاده می‌شود. اما ممکن است در برخی موارد نیاز به نرخ جریان بیشتر یا کمتر باشد.
بدون دیدگاه